تست های فلوسایتومتری

تست های فلوسایتومتری

روشی است که برای تشخیص و اندازه گیری ویژگی های فیزیکی و شیمیایی جمعیت سلول ها یا ذرات استفاده می شود.

نمونه ای که حاوی سلول ها یا ذرات است در یک سیال به حالت تعلیق درآورده و به وسیله ابزار سی سیومتر جریان داده می شود.

نمونه به طور ایده آل یک سلول را در یک زمان از طریق یک پرتو لیزر جریان می دهد و نور پراکنده به سلول ها و اجزاء آنها مشخص می شود.

سلول ها اغلب با نشانگرهای فلورسنت برچسب گذاری می شوند به طوری که نور ابتدا جذب می شود و سپس در یک گروه از طول موج منتشر می شود.

دهها هزار سلول می توانند به سرعت مورد بررسی قرار گیرند و داده های جمع آوری شده توسط یک کامپیوتر پردازش می شوند.

جریان سیاتومتری به طور معمول در تحقیقات اساسی، عمل بالینی و آزمایشات بالینی مورد استفاده قرار می گیرد.

استفاده از جریان سیاتومتری عبارتند از:

شمارش سلول
مرتب سازی سلول
تعیین ویژگی های سلولی و عملکرد
تشخیص میکروارگانیسم ها
تشخیص بیومارکر
تشخیص مهندسی پروتئین
تشخیص اختلالات صحی مانند سرطان خون
یک دستگاه تجزیه و تحلیل جریان سیاتوم یک ابزار است که داده های قابل اندازه گیری را از یک نمونه فراهم می کند.

سایر ابزارهایی که از جریان سیاتومتری استفاده می کنند شامل دسته بندی کننده های سلولی هستند،

که از لحاظ فیزیکی جداگانه و از این رو سلول های مورد علاقه بر اساس خواص نوری خود را پاک می کنند.

دیدگاه جاری از سیتمتر جریان دسکتاپ، Sector سنجش فعال فلورسنت Becton-Dickinson (FACSCalibur)

جریان سیوتومتر مدرن قادر به تجزیه و تحلیل هزاران ذره در ثانیه در “زمان واقعی” است،

و اگر به عنوان سلسله گر سلول پیکربندی شود می تواند ذرات را با خواص اپتیکی مشخص با نرخ مشابه مقایسه کند.

جریان سیاتومتر شبیه به یک میکروسکوپ است، به جز اینکه به جای تولید تصویری از سلول، جریان سی تی متریک،

مقدار کافی سنجی خودکار پارامترهای مشخص شده نوری را بر اساس سلول های سلولی ارائه می دهد.

برای تجزیه و تحلیل بافت های جامد، یک سوسپانسیون تک سلولی باید آماده شود.

جریان سیاتومتر دارای پنج جزء اصلی است: یک سلول جریان، یک سیستم اندازه گیری،

یک آشکارساز، یک سیستم تقویت کننده و یک کامپیوتر برای تجزیه و تحلیل سیگنال ها.

سلول جریان دارای جریان مایع (مایع غلاف) است که سلولها را حمل و تراز می کند تا پرونده ی تک پروانه را از طریق پرتو نور برای حسگر انتقال دهند.

سیستم اندازه گیری معمولا از اندازه گیری امپدانس (یا هدایت) و سیستم های نوری – لامپ (جیوه، زنون) استفاده می کند،

لیزرهای آب خنک با قدرت بالا (آرگون، کریپتون، لیزر رنگی)،

لیزرهای خنک کننده کم انرژی (آرگون (۴۸۸ نانومتر)، قرمز HeNe (633 نانومتر)، Green-HeNe، HeCd (UV))،

لیزر دیود (آبی، سبز، قرمز، بنفش) در نتیجه سیگنال های نور است.

سیستم آشکارساز و آنالوگ به دیجیتال (ADC)، مقادیر آنالوگ نور نور پراکنده (FSC) و نور پراکنده جانبی (SSC)،

و همچنین سیگنال های فلورسانس خاص را به سیگنال های دیجیتالی تبدیل می کند که می تواند توسط یک کامپیوتر پردازش شود.

سیستم تقویت می تواند خطی یا لگاریتمی باشد.

فرآیند جمع آوری داده ها از نمونه ها با استفاده از جریان سیات متر به نام “خرید” نامیده می شود.

بدست آوردن یک کامپیوتر با جسمی متصل به سیتومتر جریان و نرم افزاری است که رابط دیجیتال را با سیتومتر کنترل می کند.

این نرم افزار قادر به تنظیم پارامترها (مثلا ولتاژ، جبران) برای نمونه مورد آزمایش است،

و همچنین در نمایش اطلاعات اولیه اولیه در هنگام دستیابی داده های نمونه به منظور اطمینان از اینکه پارامترها به درستی تنظیم می شوند کمک می کند.

سیتومترهای جریان اولیه به طور کلی دستگاه های آزمایشی بودند،

اما پیشرفت های تکنولوژیکی کاربرد های گسترده ای را برای استفاده در انواع مختلف از اهداف بالینی و تحقیق ایفا کرده اند.

با توجه به این پیشرفت ها، بازار قابل توجهی برای ابزار دقیق، نرم افزار تجزیه و تحلیل،

و همچنین واکنش های مورد استفاده در استخراج مانند آنتی بادی های برچسب دار فلورسنتسل توسعه یافته است.

ابزارهای مدرن معمولا دارای چند لیزر و آشکارساز فلورسانس هستند.

رکورد فعلی برای ابزار تجاری ده لیزر  و ۳۰ آشکارساز فلورسانس است.

افزایش تعداد لیزرها و آشکارسازها اجازه می دهد تا برچسب های آنتی بادی چندگانه را شناسایی کرده،

و دقیق تر بتوانند یک جمعیت هدف را با نشانگرهای فنوتیپی خود مشخص کنند.

بعضی از ابزارها حتی می توانند تصاویر دیجیتال از سلول های فردی را بیاورند،

که امکان تجزیه و تحلیل سیگنال فلورسنت را در داخل یا بر روی سلول ها فراهم می کند.


مطالب بیشتر:

      ۵/۵ - (۱ امتیاز)

      بدون دیدگاه

      دیدگاهتان را بنویسید

      نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

      3 + 20 =